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Centre intégré universitaire de santé
et de services sociaux de l'Est-de-l'Île-de-Montréal

Centre intégré universitaire de santé et de services sociaux de l'Est-de-l'Île-de-Montréal

Recherche

Flow cytometry

La cytométrie en flux est une technique d’analyse des caractéristiques physiques et fonctionnelles de chaque cellule au sein d’une suspension cellulaire. Ainsi, on peut évaluer les proportions de différentes sous-populations cellulaires présentes dans le milieu a très grande vitesse (plusieurs milliers de cellules par seconde). Cette technique permet une mesure précise et rapide de paramètres tels que la taille des cellules, leur nature, leur contenu en ADN ainsi que la présence de molécules spécifiques à leur surface, intracellulaires ou intranucléaires. Ces molécules sont détectées à l’aide de sondes fluorescentes qui sont excitées par des lasers. Les membres de notre équipe fournissent une formation approfondie aux utilisateurs, les accompagnant à chaque étape, de la conception de leurs panels de fluorochromes à l'analyse des résultats, en passant par l'optimisation des étapes clés de leur expérience.

Les équipements

Notre plateforme est équipée d'instruments de cytométrie spectrale et conventionnelle à la fine pointe de la technologie permettant ainsi de réponde aux exigences variées de la recherche en santé. Nous disposons de cinq analyseurs et de deux trieurs, disponibles tant en interne qu'en externe. Tous nos équipements font l'objet d'un entretien régulier, de calibrages et d'évaluations de performance pour garantir la fiabilité et la reproductibilité des données.

Nos trieurs de cellules ARIA III et Cytek sont munis d'une hotte à pression négative permettant le tri d'échantillons potentiellement infectieux, y compris les cellules humaines provenant de donneurs sains. Cependant, l'approbation du comité de biosécurité est requise pour tout échantillon provenant de primates ou de cellules génétiquement modifiées non fixées.

Notre mission

Entretenir, Calibrer, évaluer la performance des instruments pour assurer l’obtention de résultats reproductibles tant au niveau de l’analyse que du tri cellulaire.

Former les usagers pour leur permettre d’atteindre leurs objectifs tant au niveau expérimental que théorique sur tous les sujets en rapport avec la cytométrie en flux (design expérimental, design de panel, acquisition, analyse, etc...

Clientèle

  • Laboratoire de recherche académique (CR-HMR et autres plateformes externes)
  • Industries

Services offerts

Grace à nos appareils à spectre complet nous pouvons trier et analyser jusqu’à 40 paramètres fluorescents différents en plus d’extraire l’autofluorescence des échantillons garantissant ainsi l'obtention d’une résolution inégalée.

Analyse multiparamétrique (liste non exhaustive)

  • Immunophénotypage
  • Cycle cellulaire, quantification de l’ADN et prolifération
  • Étude des espèces réactives de l'oxygène
  • Viabilité et mort cellulaire
  • Évaluation de la cytotoxicité d’une drogue ou d’un type cellulaire
  • Flux calcique
  • PH intracellulaire
  • Potentiel de la membrane cytoplasmique et mitochondriale
  • Phagocytose et autophagie
  • Autres

Tri cellulaire à haut débit en condition aseptique

  • NC2+
  • 1 à 6 populations simultanées en tubes, plaques ou sur lames
  • Cellules uniques
  • Jusqu’à 40 paramètres fluorescents

Formation et soutien

  • Acquisition sur les appareils BD Biosciences
  • Acquisition sur les appareils Cytek
  • Formations théoriques et ou pratiques personnalisables allant de la création d'expérience impliquant la cytométrie en flux à l'analyse des résultats

Station d'analyse

  • Équipée d'un MacBook Pro (16 pouces) 96 GB ram
  • De deux grands écrans (>32 pouces)
  • D'une souris sans fil
  • D'un adapteur pour câble internet
  • D'un adapteur pour prise USB-C/USB-A

Equipment

Sorters

Cytek Aurora CS

The Cytek Aurora is equipped with 5 lasers which allow the detection of 40 fluorescence parameters in addition to the size parameter (FSC) on the blue laser and the structure parameter (SSC) on the blue and violet lasers. This instrument also makes it possible to extract the auto-fluorescence of the cells which makes it possible to obtain a better resolution of the signals.

  • 305 nm Ultra-Violet: 16 fluorescence detectors
  • 405 nm violet: 16 fluorescence detectors in addition to SSC-B
  • 488 nm blue: 14 fluorescence detectors in addition to SSC-A
  • 561 nm yellow-green: 10 fluorescence detectors
  • 640 nm red: 8 fluorescence detectors

We use nozzles of different sizes (70, 100 and 130 µm) and different differential pressures depending on the type of cells to be sorted. It is possible to sort 6 populations simultaneously in tubes, in addition to sorting in plates.

Cytek Aurora cell sorter configuration PDF

BD ARIA III

The BD ARIA III is equipped with 4 lasers which allow the detection of 16 fluorescence parameters in addition to the size (FSC) and structure (SSC) parameters.

  • 407 nm violet: 6 fluorescence detectors
  • 488 nm blue: 3 detectors (SSC and 2 fluorescence detectors)
  • 561 nm yellow-green: 5 fluorescence detectors
  • 633 nm red: 3 fluorescence detectors

Nozzles of different sizes (70, 85 and 100 µm) and different differential pressures are used depending on the type of cells to be sorted. It is possible to sort 4 populations simultaneously, in addition to sorting in plates.

BD ARIA III cell sorter configuration PDF

SONY SH800

The SONY cell sorter is equipped with two collinear lasers (488 nm and 561 nm) which allow the detection of 6 fluorescence parameters in addition to the size (BSC) and structure (SSC) parameters.

70 and 100 µm chips can be used and the pressure can be modified according to the type of cells to be sorted. The SONY allows the sorting of 2 populations simultaneously and the plates sorting.

SONY SH800 cell sorter configuration PDF

Analyzers

Cytek Aurora

The Cytek Aurora is equipped with 5 lasers which allow the detection of 40 fluorescence parameters in addition to the size parameters (FSC) on the blue laser and the structure parameter (SSC) on the blue and violet lasers. This instrument also makes it possible to extract the auto-fluorescence of the cells which makes it possible to obtain a better resolution of the signals.

  • 305 nm Ultra-Violet: 16 fluorescence detectors
  • 405 nm violet: 16 fluorescence detectors in addition to SSC-B
  • 488 nm blue: 14 fluorescence detectors in addition to SSC-A
  • 561 nm yellow-green: 10 fluorescence detectors
  • 640 nm red: 8 fluorescence detectors

Cytek Aurora configuration PDF

2 BDLSRFortessa X-20

The 2 BD LSRFortessa X-20 are equipped with 5 lasers which allow the detection of 16 fluorescence parameters in addition to the size (FSC) and structure (SSC) parameters. One of them is equipped with an HTS plate reader.

  • 355 nm Ultra-Violet: 3 fluorescence detectors
  • 405 nm violet: 6 fluorescence detectors
  • 488 nm blue: 3 detectors (SSC and 2 fluorescence detectors)
  • 561 nm yellow-green: 4 fluorescence detectors
  • 633 nm red: 3 fluorescence detectors

Configuration of the 2 BD LSRFortessa X-20 PDF

BD FACSCelesta

The BD FACSCelesta is equipped with 3 lasers that allow the detection of 12 fluorescence parameters in addition to the size (FSC) and structure (SSC) parameters.

  • 405 nm violet: 5 fluorescence detectors
  • 488 nm blue: 5 detectors (SSC and 4 fluorescence detectors)
  • 633 nm red: 3 fluorescence detectors

It is also possible to change filters and mirrors on this instrument, in order to detect different combinations of fluorochromes.

Configuration options of the BD FACSCelesta PDF

BD LSRII

The BD LSR II is equipped with 4 lasers which allow the detection of 10 fluorescence parameters in addition to the size (FSC) and structure (SSC) parameters.

  • 355 nm Ultra-Violet: 2 fluorescence detectors
  • 407 nm violet: 2 fluorescence detectors
  • 488 nm blue: 5 detectors (SSC and 4 fluorescence detectors)
  • 633 nm red: 2 fluorescence detectors

It is also possible to change filters and mirrors on this instrument, in order to detect different combinations of fluorochromes.

Configuration options of the BD LSRII PDF

BD FACSCanto

The CANTO A is equipped with 2 lasers which allow the detection of 6 fluorescence parameters in addition to the size (FSC) and structure (SSC) parameters.

  • 488 nm: 5 detectors (SSC and 4 fluorescence detectors)
  • 633 nm: 2 fluorescence detectors

Configuration BD FACSCanto PDF

Définitions

CR-HMR: Centre de recherche de l’Hôpital Maisonneuve-Rosemont.

Utilisateur : Toute personne utilisant les instruments de la plateforme de cytométrie du CR-HMR

  • Utilisateur interne: Étudiant ou employé du CR-HMR
  • Utilisateur externe: Étudiant ou employé affiliés à un centre de recherche autre que le CR-HMR ainsi que les membres d’une industrie

Coordinators

Frédéric Duval, PhD
Anne-Marie Aubin, M.Sc.
514-252-3400 poste 3521

Flow cytometry is a technique allowing the analysis of the physical and functional characteristics of each cell contained in a cell suspension. Thus, it is possible to evaluate the proportions of different cell subpopulations present in a cell suspension at very high speed (several thousand cells per second). This technique allows precise and rapid measurement of parameters such as the size of the cells, their nature, their DNA content as well as the expression of surface or even intracellular molecules. These molecules are detected using fluorescent probes which are excited by lasers.

Today, the new generations of devices have up to 7 lasers which make it possible to measure more than 40 different parameters. Some devices sort cells based on these parameters and isolate them into pure cell subpopulations for further analysis or to put them in culture to study their functions.

Individual mandatory training is necessary to access our facility. The ARIA III cell sorter as well as the SONY SH800 are equipped with a negative pressure hood allowing the sorting of potentially infectious samples including human cells from healthy donors.