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Centre intégré universitaire de santé
et de services sociaux de l'Est-de-l'Île-de-Montréal

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Cytométrie en flux

La cytométrie en flux est une technique d’analyse des caractéristiques physiques et fonctionnelles de chaque cellule au sein d’une suspension cellulaire. Ainsi, on peut évaluer les proportions de différentes sous-populations cellulaires présentes dans le milieu à très grande vitesse (plusieurs milliers de cellules par seconde). Cette technique permet une mesure précise et rapide de paramètres tels que la taille des cellules, leur nature, leur contenu en ADN ainsi que la présence de molécules spécifiques à leur surface, intracellulaires ou intranucléaires. Ces molécules sont détectées à l’aide de sondes fluorescentes qui sont excitées par des lasers.

Aujourd’hui, les nouvelles générations d’appareils possèdent jusqu’à 7 lasers qui permettent de mesurer plus de 40 paramètres différents. Certains appareils trient les cellules en fonction de ces paramètres et les isolent en sous-populations cellulaires pures pour les soumettre ensuite à d’autres analyses ou les mettre en culture pour étudier leurs fonctions.

Des formations individuelles pour chacun des systèmes sont accessibles sur rendez-vous. Le trieur de cellules ARIA III ainsi que le SONY SH800 sont équipés d’une hotte à pression négative permettant le tri d’échantillons potentiellement infectieux dont les cellules humaines de donneurs sains.

Équipement

Trieurs

Cytek Aurora CS

Le Cytek Aurora est équipé de 5 lasers qui permettent la détection de 40 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) sur le laser bleu et de structure (SSC) sur les lasers bleu et violet. Cet instrument permet également d’extraire l’auto-fluorescence des cellules ce qui permet d’obtenir une meilleure résolution des signaux.

  • 305 nm Ultra-Violet : 16 détecteurs de fluorescence
  • 405 nm violet : 16 détecteurs de fluorescence en plus du SSC-B
  • 488 nm bleu : 14 détecteurs en plus du SSC-A
  • 561 nm jaune-vert : 10 détecteurs de fluorescence
  • 640 nm rouge : 8 détecteurs de fluorescence

Nous utilisons des buses de différentes tailles (70, 100 et 130 µm) et des pressions différentielles variées selon le type de cellules à trier. Il est possible de trier 6 populations simultanément en tubes, en plus de faire le tri en plaque.

Configuration Trieur Cytek Aurora PDF

BD ARIA III

Le BD ARIA III est équipé de 4 lasers qui permettent la détection de 16 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 407 nm violet : 6 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 3 détecteurs (SSC et 2 détecteurs de fluorescence)
  • 561 nm jaune-vert : 5 détecteurs de fluorescence
  • 633 nm rouge : 3 détecteurs de fluorescence

On utilise des buses de différentes tailles (70, 85 et 100 µm) et des pressions différentielles variées selon le type de cellules à trier. Il est possible de trier 4 populations simultanément, en plus de faire le tri en plaque.

Configuration Trieur BD ARIA III PDF

SONY SH800

Le trieur SONY est équipé de deux lasers colinéaires (488 nm et 561 nm) qui permettent la détection de 6 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (BSC) et de structure (SSC).

Des « chips » de 70, et 100 µm peuvent être utilisés et la pression peut être modifiée selon le type de cellules à trier. Le SONY permet le tri de 2 populations simultanément et le tri en plaque.

Configuration Trieur SONY SH800 PDF

Analyseurs

Cytek Aurora

Le Cytek Aurora est équipé de 5 lasers qui permettent la détection de 40 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) sur le laser bleu et de structure (SSC) sur les lasers bleu et violet. Cet instrument permet également d’extraire l’auto-fluorescence des cellules ce qui permet d’obtenir une meilleure résolution des signaux.

  • 305 nm Ultra-Violet : 16 détecteurs de fluorescence
  • 405 nm violet : 16 détecteurs de fluorescence en plus du SSC-B
  • 488 nm bleu : 14 détecteurs en plus du SSC-A
  • 561 nm jaune-vert : 10 détecteurs de fluorescence
  • 640 nm rouge : 8 détecteurs de fluorescence

Configuration Cytek Aurora PDF

2 BDLSRFortessa X-20

Les 2 BD LSRFortessa X-20 sont équipés de 5 lasers qui permettent la détection de 16 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC). L’un d’entre eux est équipé d’un lecteur de plaque HTS.

  • 355 nm Ultra-Violet : 3 détecteurs de fluorescence
  • 405 nm violet : 6 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 3 détecteurs (SSC et 2 détecteurs de fluorescence)
  • 561 nm jaune-vert : 4 détecteurs de fluorescence
  • 633 nm rouge : 3 détecteurs de fluorescence

Configuration 2 BDLSRFortessa X-20 PDF

BD FACSCelesta

Le BD FACSCelesta est équipé de 3 lasers qui permettent la détection de 12 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 405 nm violet : 5 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 5 détecteurs (SSC et 4 détecteurs de fluorescence)
  • 633 nm rouge : 3 détecteurs de fluorescence

Il est également possible de changer les filtres et les miroirs sur cet instrument, afin de détecter différentes combinaisons de fluorochromes.

Configuration BD FACSCelesta PDF

BD LSRII

Le BD LSR II est équipé de 4 lasers qui permettent la détection de 10 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 355 nm Ultra-Violet : 2 détecteurs de fluorescence
  • 407 nm violet : 2 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 5 détecteurs (SSC et 4 détecteurs de fluorescence)
  • 633 nm rouge : 2 détecteurs de fluorescence

Il est également possible de changer les filtres et les miroirs sur cet instrument, afin de détecter différentes combinaisons de fluorochromes.

Configuration BD LSRII PDF

BD FACSCanto

Le CANTO A est équipé de 2 lasers qui permettent la détection de 6 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 488 nm : 5 détecteurs (SSC et 4 détecteurs de fluorescence)
  • 633 nm : 2 détecteurs de fluorescence

Configuration BD FACSCanto PDF

Responsables

Frédéric Duval, PhD
Anne-Marie Aubin, M.Sc.
514-252-3400 poste 3521