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Centre intégré universitaire de santé
et de services sociaux de l'Est-de-l'Île-de-Montréal

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Flow cytometry

Flow cytometry is a technique to analyze the physical and functional characteristics of each cell within a suspension of cells. This method is used to determine the proportions of different cell subpopulations in a cell culture. It can also measure a large number of cells very quickly for the parameters of cell size and DNA content as well as the presence of specific surface, intracellular or intranuclear molecules. These molecules are detected with fluorescent probes and lasers.

Today, new generations of devices are equipped with up to 7 lasers that measure over 30 different variables. Some devices sort cells according to these parameters and isolate them into cell subpopulations for further analysis or culture so that their functions can be studied.

Individual training on each system is available by appointment. The BD FACSAria III cell sorter has a negative pressure hood to sort potentially infectious samples, including human cells from healthy donors.

Équipement

Trieurs

Cytek Aurora CS

Le Cytek Aurora est équipé de 5 lasers qui permettent la détection de 40 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) sur le laser bleu et de structure (SSC) sur les lasers bleu et violet. Cet instrument permet également d’extraire l’auto-fluorescence des cellules ce qui permet d’obtenir une meilleure résolution des signaux.

  • 305 nm Ultra-Violet : 16 détecteurs de fluorescence
  • 405 nm violet : 16 détecteurs de fluorescence en plus du SSC-B
  • 488 nm bleu : 14 détecteurs en plus du SSC-A
  • 561 nm jaune-vert : 10 détecteurs de fluorescence
  • 640 nm rouge : 8 détecteurs de fluorescence

Nous utilisons des buses de différentes tailles (70, 100 et 130 µm) et des pressions différentielles variées selon le type de cellules à trier. Il est possible de trier 6 populations simultanément en tubes, en plus de faire le tri en plaque.

Configuration Trieur Cytek Aurora PDF

BD ARIA III

Le BD ARIA III est équipé de 4 lasers qui permettent la détection de 16 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 407 nm violet : 6 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 3 détecteurs (SSC et 2 détecteurs de fluorescence)
  • 561 nm jaune-vert : 5 détecteurs de fluorescence
  • 633 nm rouge : 3 détecteurs de fluorescence

On utilise des buses de différentes tailles (70, 85 et 100 µm) et des pressions différentielles variées selon le type de cellules à trier. Il est possible de trier 4 populations simultanément, en plus de faire le tri en plaque.

Configuration Trieur BD ARIA III PDF

SONY SH800

Le trieur SONY est équipé de deux lasers colinéaires (488 nm et 561 nm) qui permettent la détection de 6 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (BSC) et de structure (SSC).

Des « chips » de 70, et 100 µm peuvent être utilisés et la pression peut être modifiée selon le type de cellules à trier. Le SONY permet le tri de 2 populations simultanément et le tri en plaque.

Configuration Trieur SONY SH800 PDF

Analyseurs

Cytek Aurora

Le Cytek Aurora est équipé de 5 lasers qui permettent la détection de 40 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) sur le laser bleu et de structure (SSC) sur les lasers bleu et violet. Cet instrument permet également d’extraire l’auto-fluorescence des cellules ce qui permet d’obtenir une meilleure résolution des signaux.

  • 305 nm Ultra-Violet : 16 détecteurs de fluorescence
  • 405 nm violet : 16 détecteurs de fluorescence en plus du SSC-B
  • 488 nm bleu : 14 détecteurs en plus du SSC-A
  • 561 nm jaune-vert : 10 détecteurs de fluorescence
  • 640 nm rouge : 8 détecteurs de fluorescence

Configuration Cytek Aurora PDF

2 BDLSRFortessa X-20

Les 2 BD LSRFortessa X-20 sont équipés de 5 lasers qui permettent la détection de 16 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC). L’un d’entre eux est équipé d’un lecteur de plaque HTS.

  • 355 nm Ultra-Violet : 3 détecteurs de fluorescence
  • 405 nm violet : 6 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 3 détecteurs (SSC et 2 détecteurs de fluorescence)
  • 561 nm jaune-vert : 4 détecteurs de fluorescence
  • 633 nm rouge : 3 détecteurs de fluorescence

Configuration 2 BDLSRFortessa X-20 PDF

BD FACSCelesta

Le BD FACSCelesta est équipé de 3 lasers qui permettent la détection de 12 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 405 nm violet : 5 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 5 détecteurs (SSC et 4 détecteurs de fluorescence)
  • 633 nm rouge : 3 détecteurs de fluorescence

Il est également possible de changer les filtres et les miroirs sur cet instrument, afin de détecter différentes combinaisons de fluorochromes.

Configuration BD FACSCelesta PDF

BD LSRII

Le BD LSR II est équipé de 4 lasers qui permettent la détection de 10 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 355 nm Ultra-Violet : 2 détecteurs de fluorescence
  • 407 nm violet : 2 détecteurs de fluorescence
  • 488 nm bleu : 5 détecteurs (SSC et 4 détecteurs de fluorescence)
  • 633 nm rouge : 2 détecteurs de fluorescence

Il est également possible de changer les filtres et les miroirs sur cet instrument, afin de détecter différentes combinaisons de fluorochromes.

Configuration BD LSRII PDF

BD FACSCanto

Le CANTO A est équipé de 2 lasers qui permettent la détection de 6 paramètres de fluorescence en plus des paramètres de taille (FSC) et de structure (SSC).

  • 488 nm : 5 détecteurs (SSC et 4 détecteurs de fluorescence)
  • 633 nm : 2 détecteurs de fluorescence

Configuration BD FACSCanto PDF

Coordinator

Martine Dupuis, MSc
514-252-3400, extension 3521

Equipment

BD LSRFortessa X-20

  • The BD LSRFortessa X-20 has 4 lasers that detect 16 fluorescence parameters in addition to cell size (FSC) and cell structure (SSC) parameters.

    • Violet (407 nm): 6 fluorescence detectors
    • Blue (488 nm): 3 detectors (SSC and 2 fluorescence detectors)
    • Yellow-green (561 nm): 5 fluorescence detectors
    • Red (633 nm): 3 fluorescence detectors

BD LSR II

  • The BD LSR II has 4 lasers that detect 10 fluorescence parameters in addition to cell size (FSC) and cell structure (SSC) parameters.

    • Blue (488 nm): 5 detectors (SSC and 4 fluorescence detectors)
    • Red (633 nm): 2 fluorescence detectors
    • Violet (407 nm): 2 fluorescence detectors
    • UV (355 nm): 2 fluorescence detectors

    The filters and mirrors on this instrument can also be changed to detect different dye combinations.

BD FACSCanto

  • The CANTO A has 2 lasers that detect 6 fluorescence parameters in addition to cell size (FSC) and cell structure (SSC) parameters.

    • 488 nm: 5 detectors (SSC and 4 fluorescence detectors)
    • 633 nm: 2 fluorescence detectors

2 BD FACSCalibur

  • The Caliburs have a blue and red-diode laser to detect 4 fluorescence parameters in addition to cell size (FSC) and cell structure (SSC) parameters.

    • 488 nm: 4 detectors (SSC and 3 fluorescence detectors)
    • 633 nm: 1 fluorescence detector

BD ARIA III Sorter

  • The BD ARIA III has 4 lasers that detect 16 fluorescence parameters in addition to cell size (FSC) and cell structure (SSC) parameters.

    • Violet (407 nm): 6 fluorescence detectors
    • Blue (488 nm): 3 detectors (SSC and 2 fluorescence detectors)
    • Yellow-Green (561 nm): 5 fluorescence detectors
    • Red (633 nm): 3 fluorescence detectors

    Nozzles of different sizes (70, 85 and 100 µm) and various differential pressures are used depending on the type of cells to be sorted. Four populations can be sorted simultaneously, in addition to the plate sorting function.

SONY SH800 Sorter

  • This SONY Sorter has two collinear lasers (488 nm and 561 nm) that detect 6 fluorescence parameters in addition to cell size (BSC) and cell structure (SSC) parameters.

    The system offers 70 µm and 100 µm chips, and the pressure can be changed for the type of cells to be sorted. The SONY can sort 2 populations simultaneously and has a plate sorting function.

    Software
    Through the cytometry platform, researchers have access to BD CellQuest Pro, BD FACSDiVa, BD FCAP Array, ModFit (Verity Software), FlowJo, FlowLogic and Cytobank.